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本制品是采用蛋白浓缩离心管快速浓缩小量蛋白样品的试剂盒。本蛋白浓缩柱使用蛋白质低吸附性的BalBproExtra再生纤维素过滤膜制造，具有快速、方便、回收率高的特点，可替代并优于透析法及蛋白沉淀法的蛋白浓缩方法。

蛋白浓缩管是一种方便的蛋白浓缩工具，只需要离心操作即可以用来对蛋白质液体样本进行浓缩，还可以用于抗原、抗体、酶和微生物的浓缩纯化。也可以用来对蛋白质样品进行缓冲液置换。还可以用来分离蛋白质标记时未结合上的游离标记物。

• 对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩；
  
• 组织培养提取物或细胞裂解液中蛋白质组分的纯化；
  
• 生物样品浓缩：包括各种抗原、抗体、酶、微生物；
  
• 蛋白质缓冲液更换。

• 高回收率>90%；
  
• 垂直结构的膜减少了浓差极化，加快离心速度，快达5分钟；
  
• 热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低；
  
• 100%完整性检测确保性能可靠；
  
• 透明外壳和体积刻度方便样品察看；
  
• 直接吸取样品减少处理步骤；
  
• 高浓缩倍数：高达80～100倍。

• 不同的蛋白浓缩的速度不同，有的需要长时间离心，有的则很快就好。和蛋白样品纯度，所用buffer类型，蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间，观察一下浓缩速度。
  
• 如果需要多次重复使用，离心速度不要太高。
  
• 重复使用时要仔细检查管壁上有没有裂纹。
  
• 浓缩柱浓缩蛋白会有蛋白损失，样品体积大就分批离心，尽可能不要离心时间太长。
  
• 样品里的杂质如果可能尽量在离心前去除一些。
  
• 分子量小于5kD的溶质可能只有部分被截留。2kD的样品截留率大约只有40%。目的蛋白小于5kD的样品不要使用浓缩管法浓缩。
  
• 浓缩液的样本回收率低可能是由于吸附损失、过度浓缩，或样本穿过滤膜而造成的。
  
• 吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤浓缩管表面接触的温度和时间、样本成分及pH。为了最大限度降低损失，离心后请立即回收浓缩后的样本。
  
• 如果样本的起始浓度很高，请监控离心过程，以免样本过度浓缩。过度浓缩会导致沉淀，这也可能带来样本损失。
  
• 样本有可能穿过滤膜，务必将每次的滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。
  
• 样品蛋白最低起始浓度为25μg/mL。
  
• 加蛋白液或Buffer到浓缩管时，可以用蓝枪头；但从浓缩管底吸取浓缩好的目的蛋白时，必须用黄枪头；用枪头伸入浓缩管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜。
  
• 浓缩柱配有2个微量离心管，在操作过程中，一个可用于收集滤出液，而另一个用于回收浓缩后的样本。用过的浓缩管要保持过滤膜湿润，不能干掉。

• 将内管插入所提供的一个微量离心管中。
  
• 向内管中加入不超过500μL的样本，并盖上盖子。
  
• 将盖好盖子的浓缩管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。
• 以2000～10000×g离心约10～30分钟。
  
  • 务必将滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。
    
  • 影响流速的因素包括样本浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。500μL样本的典型离心时间大约是10至30分钟。尽管大部分样本在离心开始后的前5至10分钟发生过滤，但在离心10至30分钟后才能达到最低的浓缩液体积（15～20μL）。
• 离心结束后将整个浓缩管从离心机中取出，取出内管。
  
• 为了回收浓缩后的溶质，将内管倒过来插在另一个干净的微量离心管中。放在离心机中，让打开的盖子朝着转子的中央；用一个类似的离心管进行平衡。以1000×g离心2分钟，使浓缩后的样本从浓缩内管转移到收集管中。滤液可以保存在收集管中。
  
• 将蛋白浓缩管清洗后用于浓缩其它蛋白样品。
  
• 清洗和保存：
  
  • 使用后用水冲洗干净；
    
  • 内管加入超纯水500μL，5000g离心5分钟；
    
  • 净内管中的水，加入500μL 0.1M NaOH，5000g离心20分钟；
    
  • 用0.1M NaOH浸泡24小时；
    
  • 用水冲洗干净；
    
  • 用无菌水浸泡2～8℃保存。
    
  • 外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。

• 蛋白浓缩柱会损失蛋白吗？
  分子量小于3000 Da的蛋白质或多肽样品会穿透过滤膜，不适合用本浓缩柱进行浓缩。3000-6000Da的蛋白质会有少量损失。6000Da以上的蛋白质损失很小。
  
• 膜会因为离心时间过长而变干么？
  不会，因为浓缩柱有死体积，总会有溶液残留在滤管中。死体积大约10～20μL。
  
• 可以重复使用浓缩柱么？
  可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当，可以反复使用多次。但是多次重复使用后过滤膜有破损风险，注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。
  
• 蛋白在浓缩时出现了沉淀，如何改进？
  蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白浓缩后的最终浓度不超过20mg/mL。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白，方法是：
  
  • 离心力降低30%～50%。
    
  • 在浓缩过程中取出浓缩管，用枪头反复吹吸几次。